KRAS 8 ሚውቴሽንስ ዲቴክሽን ኪት (ፍሎረሰንስ ፒሲአር)-RUO
የምርት ስም
KRAS 8 ሚውቴሽንስ ዲቴክሽን ኪት (ፍሎረሰንስ ፒሲአር)-RUO
ኤፒዲሚዮሎጂ
በKRAS ጂን ውስጥ የነጥብ ሚውቴሽን በተለያዩ የሰው ቲዩመር ዓይነቶች ላይ ተገኝቷል፣ በቲዩመር ውስጥ ከ17% ~ 25% የሚውቴሽን መጠን፣ በሳንባ ካንሰር ታማሚዎች ከ15% ~ 30% የሚውቴሽን መጠን፣ በኮሎሬክታል ካንሰር ታማሚዎች ከ20% ~ 50% የሚውቴሽን መጠን። በK-ras ጂን የተቀመጠው የP21 ፕሮቲን ከEGFR የምልክት መንገድ በታች ስለሚገኝ፣ ከK-ras ጂን ሚውቴሽን በኋላ፣ የታችኛው የምልክት መንገድ ሁልጊዜ ይነቃቃል እና በEGFR ላይ ባሉ የላይኛው የታለሙ መድኃኒቶች አይጎዳም፣ ይህም የሕዋሶች ቀጣይነት ያለው አደገኛ እድገት ያስከትላል። በK-ras ጂን ውስጥ የሚደረጉ ሚውቴሽኖች በአጠቃላይ በሳንባ ካንሰር ታማሚዎች ላይ ለEGFR ታይሮሲን ኪናሴ አጋቾች እና በኮሎሬክታል ካንሰር ታማሚዎች ላይ ለፀረ-EGFR ፀረ እንግዳ አካላት መድኃኒቶች መቋቋምን ይሰጣሉ [1፣ 2፣ 3]። እ.ኤ.አ. በ2008፣ ናሽናል ኮምፕረሲቭ የካንሰር ኔትወርክ (NCCN) ለኮሎሬክታል ካንሰር የክሊኒካዊ ልምምድ መመሪያ አውጥቷል፣ ይህም የK-ras እንዲነቃ የሚያደርጉ የሚውቴሽን ቦታዎች በዋናነት በኤክሶን 2 ኮዶኖች 12 እና 13 ውስጥ እንደሚገኙ ጠቁሟል፣ እና ከፍተኛ ሜታስታቲክ ኮሎሬክታል ካንሰር ያለባቸው ሁሉም ታካሚዎች ከህክምናው በፊት ለK-ras ሚውቴሽን ምርመራ ሊደረግላቸው እንደሚችል አሳስቧል[4]። ስለዚህ፣ የK-ras ጂን ሚውቴሽን ፈጣን እና ትክክለኛ መለየት በክሊኒካዊ የመድኃኒት መመሪያ ውስጥ ትልቅ ጠቀሜታ አለው። ይህ ኪት ዲኤንኤ እንደ የምርመራ ናሙና በመጠቀም የሚውቴሽን ሁኔታን ጥራት ያለው ግምገማ ያቀርባል፣ ይህም ክሊኒኮችን ከታለሙ መድኃኒቶች ተጠቃሚ የሆኑ የኮሎሬክታል ካንሰርን፣ የሳንባ ካንሰርን እና ሌሎች የቲዩመር ታካሚዎችን በማጣራት ረገድ ይረዳል። የኪቱ የምርመራ ውጤቶች ለክሊኒካዊ ማጣቀሻ ብቻ ናቸው እና ለታካሚዎች የግል ሕክምና ብቸኛ መሠረት ሆነው ጥቅም ላይ መዋል የለባቸውም። ክሊኒኮች በምርመራ ውጤቶቹ ላይ አጠቃላይ ፍርዶችን እንደ የታካሚው ሁኔታ፣ የመድኃኒት አመላካቾች፣ የሕክምና ምላሽ እና ሌሎች የላቦራቶሪ ምርመራ አመልካቾች ባሉ ምክንያቶች ላይ በመመስረት ማድረግ አለባቸው።
የቴክኒክ መለኪያዎች
| ማከማቻ | ≤-18℃ |
| የመደርደሪያ ዕድሜ | 12 ወራት |
| የናሙና አይነት | በሰው ፓራፊን የተካተቱ የፓቶሎጂ ክፍሎች |
| CV | ≤5.0% |
| ሎድ | ሀ) የK-ras Reaction Buffer A እና የK-ras Reaction Buffer B በ3ng/μL የዱር-አይነት ዳራ ስር 1% የሚውቴሽን መጠንን በተረጋጋ ሁኔታ መለየት ይችላሉ፤ ለ) የ1×10 ሚውቴሽን3ቅጂዎች/ሚሊ ሊትር በ1×10 የዱር አይነት ዳራ ላይ በተረጋጋ ሁኔታ ሊገኙ ይችላሉ5የሚውቴሽን መጠኑ 1% ሲሆን/mL ቅጂዎች፤ ሐ) የኩባንያው LoD ማጣቀሻ SW3 ሲፈተሽ፣ የReaction Buffer A እና Reaction Buffer B የCt እሴት ወይም የCt እሴት=0 የለም። |
| የሚመለከታቸው መሳሪያዎች | የተተገበሩ ባዮሲስተምስ 7500 ቅጽበታዊ PCR ስርዓቶች፣ የተተገበሩ ባዮሲስተምስ 7300 ቅጽበታዊ PCR ስርዓቶች፣ የQuantStudio®5 ቅጽበታዊ PCR ስርዓቶች፣ የLightCycler® 480 ቅጽበታዊ PCR ስርዓት፣ የBioRad CFX96 ቅጽበታዊ PCR ስርዓት። |
የስራ ፍሰት
ሪአጀንት ያስፈልጋል ነገር ግን አልተሰጠም፦ዲኤንኤሴ/አርናሴ የሌለው H2O፣ አንሃይድሮስ ኤታኖል። በፓራፊን የተጨመረ የቲሹ ናሙና ሲፈተሽ፣ የQIAGEN QIAamp DNA FFPE ቲሹ ኪት (56404) እና በቲያንገን ባዮቴክ(ቤጂንግ) ኩባንያ ሊሚትድ የተመረተውን የፓራፊን-ኢምቤድ ቲሹ ዲኤንኤ ፈጣን ኤክስትራክሽን ኪት (DP330) እንዲጠቀሙ ይመከራል።
የፍጆታ ዕቃዎች ያስፈልጋሉ ነገር ግን አልተሰጡም፦ከዲኤንኤሴ/አርኤንኤሴ ነፃ የሆኑ ጫፎች፣ የሚጣሉ ጓንቶች፣ ከዲኤንኤሴ/አርኤንኤሴ ነፃ የሆኑ የሴንትሪፉጅ ቱቦ፣ 8-ቱቦ ስትሪፖች፣ ሴንትሪፉጅ።
